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FG0336血漿遊離DNA提取試劑盒 (磁珠法)

[項目編號]FG0336-L

[規格]96

無血漿DNA提取試劑盒 (磁珠法)

 

【產品介紹

試劑盒采用自主研發的磁珠淨化技術和獨特的緩衝係統,適用於大批量 (1毫升 ~4毫升)EDTA血漿,免費DNA樣品儲存管血漿 (例如:Streck無細胞DNA BCT無創采血管,CWBIODNA樣品儲存管等) 提取遊離DNA(cfDNA),提取過程不涉及氯仿、苯酚等有毒試劑,提取cfDNA純度高,質量穩定可靠,可用於普通用途。PCR,定量PCR、芯片檢測、高通量測序等下遊實驗。該試劑盒還可與移液工作站和磁棒法自動核酸提取係統高效使用。

 

凡知醫療科技 (江蘇) 有限公司

【儲存條件

蛋白酶K解決方案存儲在-20 ℃

磁珠懸浮液儲存在2 ~ 8 ℃

室溫下的其他組件 (15 ~ 30 ℃) 保存

 

【套件組件

組件名稱

96

裂解物LB

200 毫升

緩衝區WB

400毫升

洗脫液EB

10 毫升

蛋白酶K

10毫升

磁珠懸浮液

8毫升

20% SDS

20毫升

 

 

 

 

 

 

 

 

 

【用戶提供的設備和試劑

75%乙醇,而不是更多2

無水乙醇

分析純異丙醇

1.5毫升,15毫升離心管

微管磁性框架

水浴鍋

恒溫振蕩金屬浴或普通金屬浴

渦流混合器

 

【試劑製備

緩衝區WB準備: 請使用緩衝溶液WB,如試劑瓶標簽所示,在其中加入無水乙醇,混合均勻,標記均勻。

 

注意事項:

使用前檢查裂解液LB,20% SDS,如果有結晶或沉澱,請放入56 ℃在使用前重新溶解在水浴中並搖勻。

磁珠懸浮液在使用前需要旋流混合。20秒或者混合好。

由於冷凍和離心可能會嚴重損害磁珠的性能和性能,因此請勿冷凍和離心磁珠的懸浮液。

雞蛋白色酵素K溶液應長時間保持在室溫下,避免反複凍融,以免影響其活性。

 

【程序】

2毫升樣本大小;

15毫升離心管100 μ l蛋白酶K解。

2毫升血清/將血漿樣品 (在室溫下熔化) 放在上述離心管中,吹製並均勻混合。

(注意: 當樣本量不足時2毫升PBS解決方案得到補充2毫升。)

添加到離心管中200 μ l 20% SDS溶液,渦旋並混合均勻; 再次添加2毫升裂解物LB,充分渦旋和混合。放置在66 ℃在水浴鍋中孵育15分鍾,在每個時期5分鍾漩渦混合了一次。

添加到離心管中2毫升異丙醇,渦旋混合30秒; 加入80 Μ l磁珠,渦流振蕩使磁珠充分懸浮,室溫靜置10分鍾

將離心管轉移到磁性框架上,並使其站立。3分鍾大約是這樣。當磁珠完全吸附時,小心吸收和丟棄上清液,避免吸收和丟棄磁珠,並從磁框上取下離心管。

加入4毫升緩衝區WB,渦流混合1分鍾,放置在磁性框架上,室溫站立。磁珠完全吸附並小心吸收上清液後,從磁框上取下離心管。

重複步驟6一次。

加入4毫升75%乙醇,渦流混合1分鍾,放置在磁性框架上,室溫站立。磁珠完全吸附並小心吸收上清液後,從磁框上取下離心管。

重複步驟8一次。

加入1毫升無水乙醇,渦流混合1分鍾,轉移珠粒懸浮液1.5毫升離心管並將其放在磁性框架上。當磁珠被完全吸附時,小心地吸收和丟棄上清液,避免磁珠被吸收和丟棄。

將離心管保持在磁性框架上,將管壁和管底部的殘留液體完全幹燥,並使其在室溫下靜置。10分鍾大約,幹燥磁珠。在此過程中,可以使用小範圍的移液管槍吸出管底部的殘留液體。

注意:1) 磁珠表麵暗淡,表明已完全幹燥;2) 避免乙醇殘留,影響後續實驗。

添加到離心管中50 ~ 100微升洗脫液EB(預熱56 ℃) 、用移液管吹或旋轉1分鍾磁珠被重新懸浮並轉移到恒溫振蕩金屬浴中,56 ℃,1500轉/分,10分鍾。如果金屬浴沒有振蕩功能,普通金屬浴可以每隔一段時間使用一次。3分鍾輕輕旋渦一次。

將離心管轉移到磁性框架上,並使其站立。磁珠完全吸附後,小心地將洗脫液轉移到新的離心管中,-20保存待機。

 

地址: 中國江蘇省昆山市晨豐路222號

電話號碼:18556994917苗小姐

電子郵件:xin_chen@firegenbiomed.com

 

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